ADCC即抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用(antibody dependent cell-mediated cytotoxicity, ADCC),是指表达Fc受体的免疫细胞通过识别抗体的Fc段直接杀伤与抗体特异性结合的靶细胞的作用。现如今,ADCC作用机制被用来检测、评定抗体或靶细胞的功效。抗体与细胞表面上的目标抗原结合。如果抗体的 Fc 段同时结合到效应细胞(主要为自然杀伤细胞, natural killer cells )表面的 Fc γ RIIIa 受体上,两种类型的细胞即发生多重交联,导致 ADCC 作用机制通路的激活。 靶细胞的杀伤是此活化途径的终点,这一指标被用在经典的 ADCC 生物活性检测中,这些经典的检测方法利用供者的外周血单核细胞( PBMC )或自然杀伤( NK )细胞亚群作为效应细胞。这些细胞的应答变异性很大,难于制备,并容易引起很高的背景读数。
ADCC Reporter细胞系选择了 ADCC 作用机制通路激活过程中较早的事件作为检测的读出指标:即效应细胞中由 NFAT (活化 T 细胞核因子)通路介导的基因转录的激活。此外, ADCC 报告基因检测试剂盒使用工程改造的 Jurkat 细胞作为效应细胞,该细胞稳定表达了 FcγRIIIa 受体(158F和高亲和158V)和由 NFAT 应答元件驱动表达的萤火虫萤光素酶。 抗体在 ADCC 作用机制中的生物活性通过 NFAT 通路活化产生的萤光素酶定量,而效应细胞中的萤光素酶活性通过生物发光读数定量。检测的信号值高,且背景很低。
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